Primer ejercicio
La actividad enzimática máxima de la enzima T es a un pH de 8, qué amortiguador podría usar para esta reacción? Realice los cálculos para obtener 500ml del amortiguador seleccionado a una concentración de 150mmol/l.
Respuesta:
Ya que la actividad máxima de la enzima es a un pH de 8, podían utilizar cualquier sal cuyo acido o base conjugada tuviese un pKa cercano a 8, por ejemplo: el ácido pirofosfórico pKa4 = 8,22; el ácido fosfórico pKa2 = 7,21; ion amonio pKa = 9,25
El cálculo lo podían hacer con cualquiera de ellos, vamos a tomar el ácido pirofosfórico para el ejercicio.
El primer paso es establecer la sal, entonces tomaremos pirofosfato de sodio.
Segundo, escribir la ecuación:
H4P2O7 < ------ > H3P2O7-1
H3P2O7-1 < ------ > H2P2O7-2
H2P2O7-2 < ------- > HP2O7-3
HP2O7-3 < ----- > P2O7-4 pKa 8,22
Entonces,
150mmol H4P2O7 + 600mmol NaOH ------ > 150mmol Na4P2O7 + 600mmol H2O
150mmol Na4P2O7 < ----- > 150mmol P2O7-4 + 600mmol Na+
Tercero, escribir la ecuación de Henderson-Hasselbalch
pH = pKa + (log[P2O7-4] – log [H4P2O7])
entonces,
8 = 8,22 + log 150mmol/L – log [H4P2O7]
log [H4P2O7] = 8,22 + 2,18 -8
log [H4P2O7] = 2,40
[H4P2O7] = 10^2,40 (antilogaritmo)
[H4P2O7] = 251,2 mmol/L
Cuarto, determinar cuánto tomar de las soluciones madre de H4P2O7 y NaOH
V1 = (V2 * C2 ) / C1
V1 H4P2O7 = (500ml * 251,2mmol/L) / 1500mmol/L
V1 H4P2O7 = 83,73ml
V1 H4P2O7 = (500ml * 150mmol/L) / 1500mmol/L
V1 H4P2O7 = 50ml
Total H4P2O7 = 133,73ml
V1 NaOH = (500ml * 600mmol/L ) / 1500mmol/L
V1 NaOH = 200ml
Finalmente, se plantea cómo se haría el amortiguador:
Se mezclan 200ml de NaOH, 133,73ml de H4P2O7 y se lleva hasta 500ml con agua destilada, confirmar el pH con potenciómetro.
Segundo ejercicio
La actividad enzimática máxima de la enzima R es a un pH de 5, realice una solución amortiguadora de propionato de sodio 200mmol/l pH5 para la reacción enzimática.
Respuesta:
Este ejercicio se resuelve igual al anterior. pKa del ácido propiónico 4,87 (CH3CH2COOH).podían tomar cualquier volumen final, para un litro la cantidad de ácido adicionado es 232ml y de base 133,33ml
Tercer ejercicio
La enzima M fue aislada de hígado de ratón, la actividad máxima de la enzima es a pH 3,5. Realice los cálculos para obtener un amortiguador a ese pH usando ácido láctico. La concentración de la sal debe ser de 50mmol/l en 150ml de solución amortiguadora.
Respuesta:
Este ejercicio se resuelve igual al anterior. pKa del ácido láctico 3,86 (CH3CHOHCOOH).
Para formar la sal podían usar KOH o NaOH. Cantidad de ácido adicionado 16,48ml, cantidad de base 5ml.
La actividad máxima de la enzima Q es a un pH de 12, realice un amortiguador de fosfato 250mmol/l en 300ml a ese pH.
Respuesta:
Este ejercicio se puede resolver igual al anterior. pKa3 del acido fosfórico 12,3 (H3PO4)
H3PO4 + KOH -------- > KH2PO4
KH2PO4 ------ > K2HPO4
K2HPO4 ----- > K3PO4
Entonces globalizando la ecuación:
H3PO4 + 3 KOH -------- > K3PO4 + 3H2O
250mmol H3PO4 + 750mmol KOH -------- > 250mmol K3PO4 + 750 H2O
250mmol K3PO4 ------ > 250mmol PO4-3 + 750mmol K+
Escribiendo la ecuación de Henderson-Hasselbalch:
12 = 12,3 + log 250 – log [H3PO4]
log [H3PO4] = 2,7
[H3PO4] = 10^2,7
[H3PO4] = 501,2 mmol/L
Determinar los volúmenes a tomar de las soluciones madre a 1500mmol,
V1 [H3PO4] = (300ml * 501,2 mmol/L) / 1500mmol/L
V1 [H3PO4] = 100,24ml
V1 [H3PO4] = (300ml * 250 mmol/L) / 1500mmol/L
V1 [H3PO4] = 50ml
Volumen total de ácido 150,24ml
V1 KOH = (300ml * 750 mmol/L) / 1500 mmol/L
V1 KOH = 150ml
El amortiguador se hara mezclando 150ml de KOH y 150,24ml de H3PO4 para un volumen final de 300,24ml
Nota: La sal K3PO4 se forma con 150ml de KOH y 50ml de H3PO4 el amortiguador a pH 12 se dará con los 100,24ml de más de ácido.
Quinto ejercicio
Realice los cálculos para obtener un amortiguador de carbonato para la enzima Y cuya máxima actividad enzimática es a un pH de 9,5. Realice 400ml de amortiguador a una concentración de 70mmol/l.
Respuesta:
pKa2 del ácido carbónico 10,25 (H2CO3). Cantidad de ácido adicionado 122,41ml. Cantidad de base adicionada 37,33ml.
NOTA GENERAL
Recuerden que los amortiguadores también se pueden hacer con una sal que ya viene comercial y la adición de su correspondiente ácido o base débil. En estos ejercicios, todos fueron resueltos con la adición de un ácido débil y una base fuerte por separado para formar la sal en la solución, y con un exceso de ácido para lograr el amortiguador.
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